1、取材固定:将老鼠杀死后,立刻取脑组织置于4%的多聚甲醛液中固定24h以上。
2、高尔基染色:用生理盐水将脑组织轻轻漂洗几遍,将需要的实验部位切成2-3mm厚的脑组织块,高尔基染液将脑组织块*浸没,放置阴凉通风处避光处理14天,浸泡48h后,换一次新染液,之后每隔3天换一次新染液。
3、组织块脱水:将组织块取出,置于15%的蔗糖溶液中4℃且避光条件下脱水约1天,取出组织块,置于30%的蔗糖溶液中4℃且避光条件下脱水2天。
4、显影:将组织块取出,蒸馏水洗1min,浓氨水处理45min,蒸馏水洗1min,定影液处理45min,蒸馏水洗1min。
5、脱水冰切封片:置于30%的蔗糖溶液中4℃且避光条件下脱水2-3天,冰冻切片100um,甘油明胶封片,拍照保存结果。
6、显微镜镜检,图像采集分析。
二、结果判读:
神经元呈黑色,胶质细胞呈黑色,背景灰色或者棕黄色。
三、高尔基染色的注意事项:
1、染液配制的量需要根据实际情况来定,配制过多易造成浪费。
2、染液一定要避光保存,并且实验过程中的每一步操作都要求避光。
3、染色完成后,若客户需要返还组织块,将剩余组织块放在30%的蔗糖中4℃避光运输。
四、公司介绍:上海茁彩生物科技有限公司,可以承接诸多病理实验,样本不仅含有基础的动物组织切片,还包括植物叶片、动物细胞、骨片、脑片、皮肤等特殊样本。染色种类多,染色方法全.石蜡染色,冰切染色均可操作,同时还可以承接整体实验项目,细胞实验项目,包括样本的造模,细胞的培养,以及后续细胞的增殖、细胞粘附、细胞划痕等实验。
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